山西北部地区长爪沙鼠分布调查方案

长爪沙鼠是传播鼠疫的主要宿主之一，主要分布在河北、陕西、内蒙古、甘肃、宁夏等地，构成了内蒙古高原长爪沙鼠鼠疫自然疫源源地。根据有关资料记载和我省20世纪80年代初开展的鼠传疾病地理区划调查结果显示,雁北间山盆地干草原小区、桑干河与恒山山脉之间的狭长地带中，有长爪沙鼠分布。为进一步掌握长爪沙鼠分布及有关资料，有必要进行一次调查，特制订本方案。

一、调查目的

通过调查掌握长爪沙鼠及体外寄生虫在当地的种群数量、分布范围和鼠间鼠疫流行动态。对今后预测和预防鼠间疫情提供流行病学依据。

   二、调查点的选定

  大同市南郊区、偏关县、垣曲县选点开展调查，每个县选外围的5个乡（镇），每个乡选外围的1个村为调查点，以驻地自然村名作为调查点名。根据调查结果随时调整县、乡、村调查点：如通过调查有长爪沙鼠分布的点，连续调查三次后，终止该点调查，继续向外扩延，重新选定调查点进行调查。如通过三次调查证明没有长爪沙鼠分布的点，终止该点调查，向内重新选定调查点进行调查，直至掌握长爪沙鼠的分布范围为止。

三、调查内容及方法

1、样地选择：每个调查点，按不同的地理景观，选择有代表性4块样地。

2、捕鼠方法：

（1）采用五米夜夹法：进行小型鼠类密度调查，2块样地布放中号铁板鼠夹，每块样地放50把，共一百把。鼠夹布放，每隔五米支放一个，排成一条直线或随地形形成曲线，如放两行，行间距离不小于50米。诱饵统一为油饼，傍晚布夹，翌日清晨收夹。

（2）笼夹法:2块样地，每块样地100m×100m为单元，布放鼠笼，每块样地布笼50个，共100个。长爪沙鼠不冬眠，主要为昼间活动，上午9时前布放鼠笼，布放笼后，每2小时巡视1次，巡视时取下捕到的鼠并将鼠笼在原洞口重新布好，连续捕抓，傍晚收回鼠笼。按照长爪沙鼠的日间活动规律与日照时间有关，一般来讲，冬季（1 月份）平均活动6小时，夏季（7月份）活动长达13个小时以上。冬季在中午活动。风天、雨天对其活动都有影响的特性，布放鼠夹（笼）的时间根据季节变化适当调整。

（3）记录捕鼠情况；包括布夹（笼）时间、样地名称、布夹（笼）数、收回夹（笼）数、捕获鼠数、鼠种类，计算平均鼠密度和长爪沙鼠密度。将捕获鼠编号、单只装入鼠袋，带回实验室采血、检蚤。

3、鼠体寄生虫分类：收回的鼠用乙醚熏蒸后，并从鼠体上及鼠袋内捡取体外寄生蚤、蜱、螨，计算染蚤（蜱、螨）率和蚤（蜱、螨）指数。将同一个调查点的同一种鼠的寄生虫装在一个盛有75%酒精的玻璃瓶中，标明采集地点、时间、数量、宿主名称等，逐个鉴定种类，并对鉴定后的蚤、蜱、螨浸泡保存。（见附件1）

4、鼠类标本制作：每个调查点捕获的各种鼠类，都要挑选一些皮毛、头骨完整的成熟个体，剥制成固态标本。稀有种类，即使残破，也要尽量制成标本保存。其他鼠尸，鉴定登记，捡取寄生虫后，挖坑深埋。（见附件2）

5、血清学调查：对活体长爪沙鼠捡蚤后，股动脉采血2ml以上，做鼠疫间接血凝抑制实验。

6、填写调查表：在调查中，按照原设计的表格，要认真、细致、准确的填写，做好原始记录。

四、调查时间

每年7—9月，每月每个点调查一次。

五、调查总结

调查工作结束后，对调查资料包括：调查范围、地理地貌、鼠的分布种类、当地的优势鼠种；长爪沙鼠的分布、密度及鼠体（包括各种鼠类）的染蚤（蜱、螨）率、蚤（蜱、螨）指数和种类进行收集、整理、分析，撰写出调查报告。

六、现场调查物品

（1）器械：

手术剪（中），止血钳（中），镊子（中），胶布，棉棒，载玻片，       盖玻片，标签 ，加拿大树胶，樟脑精，鼠袋，记号笔， 碘伏(50ml)   75%酒精 (50ml)，一次性微量板，一次性无菌试管（5ml锁扣帽），尖嘴老虎钳。  

（2）个人防护

线手套 ，防蚤袜，胶鞋，乳胶手套，一次性手术衣 ， 一次性帽子，一次性口罩 。

附件：  1、蚤类标本的采集与制作方法

2、啮齿动物标本的制作方法

3、调查表格

                              2018年3月

附件1

蚤类标本的采集与制作方法

   (一)蚤类标本的采集

  1、采集途径与方法

   (1)从动物体上采集  将捕获的活鼠连同鼠笼一起装入白布制作的鼠袋内，如为死鼠亦可按不同的种类装入鼠袋内，扎紧袋口，并附上捕获的时间、地点的标签，带回实验室分类鉴定和病原分离。在检查时将装有鼠的布袋置于密封的有盖熏鼠箱或其他容器内，并投入一定量的乙醚或氯仿将老鼠及体外寄生蚤熏死或至昏迷，一般需15分钟左右。然后在白瓷盘内按不同鼠种进行检蚤。检蚤可以小镊子逆宿主的皮毛翻检或以蓖梳梳刷皮毛上的蚤，最后要检查布袋内逃逸的跳蚤。

   如必须检取活蚤则不宜用麻醉药物，而将小动物拉颈至毙，大动物以水淹窒息。然后将宿主放入水盆或其他容器中水浸，则体外寄生蚤会逐渐浮于水面，再用解剖针或小镊子检蚤并置入盛蚤容器内，盛蚤容器内底部可垫1张滤纸吸水，同时应注意容器能防止活蚤逃逸。如宿主是大型牲畜可直接在体外检蚤。

(2)从宿主窝巢内采蚤  鼠巢、鸟窝内常有大量的跳蚤。要采集窝巢蚤，应把窝巢中的一切垃圾碎屑以及表层浮土等收集装入布袋带回实验室，将窝巢内容物一点一点地倒入白瓷盘内仔细检集，如巢穴内容物是大量的，则可用加热和光照进行分离。

由于巢穴中往往藏有蚤卵和茧，可在检蚤完毕后将巢内容物保留7-10天后再检查，届时卵已孵为幼虫，茧亦羽化成蚤。

  （3）从宿主洞口采蚤  如采集洞道游离的跳蚤，可在洞口及其附近用1块白绒布(约8Ocm左右)来回拖动数次，游离蚤可粘附其上或钻人绒絮内。亦可用粘蚤纸布放于洞口附近，但收集保存标本则不宜用此法。

   (4)室内地面游离蚤采集  可于地面放置水盘或用粘蚤纸方法收集室内游离蚤，亦可用一块白绒布在地面上拖动收取跳蚤。

   2、蚤类采集中应注意的事项

  （1）为了保证安全，避免被蚤叮咬，尤其在疫区采蚤，应注意个人防护，如穿防蚤袜、扎紧袖,口等，亦可在暴露部位涂抹驱避剂或菊酯类杀虫剂，如检活蚤最好有专用的检蚤室，工作完毕应喷洒杀虫剂，杀灭可能逃逸的蚤及其他节肢动物。

  （2）在采集中必须做详细的记录。从每只宿主体外所检获的蚤类标本应单独放大一个小容器内，并附以标签，标签宜用铅笔写明宿主名称、采集日期、采集地点及生境(如草原、针阔林、海拔高度等)、采集者等。

   (二)非透明标本的鉴定、保存与送检

   1、非透明标本的鉴定  在调查工作中，对所采集到的跳蚤往往要作初步鉴定，一般是在双目解剖镜下进行。大体的鉴定需要专业人员十分熟悉蚤的分类特征、生态特性等。结合蚤类所寄生的宿主、季节、蚤的体型和颜色等综合判定。一般先在解剖镜下大体归类后，对鉴定不清或有疑问的，可将其横放于载玻片上，滴一点生理盐水后加盖玻片，于低倍显微镜下利用不同方向和光源观察其主要部位的特征并作出鉴定，尚可抽样作透明标本证实，一般非透明的蚤类标本多以几丁质厚的部位特征来鉴定，如头部特征中包括眼的发达或退化，颊栉有无及多少、腹栉的有无以及比较易观察的一些鬃，如眼鬃、臀前鬃等。总之，专业人员需熟练掌握各种蚤的外部特征和本地区的蚤种分布情况。

    2、蚤的保存与送检  （1）采集到的跳蚤如不作细菌检查可直接保存于75%酒精中，或作透明封片标本。（2）作为实验室内饲养或研究的活蚤，可置于洁净的试管或小瓶内，管或瓶底放入少许细沙或滤纸块(厚约lcm)，再放1-2片无异味的青草，以便使小环境湿润。管口或瓶口用橡皮塞或软木塞塞紧，不能用棉塞。并将容器置于阴暗处，避免接触化学药物。(3)死蚤及作细菌分离的蚤亦可用保存液存放，将蚤放人1/20万龙胆紫和2%食盐水溶液中，一般保存3日仍可从蚤体分离出鼠疫菌。这种保存液的制备是将1g龙胆紫溶入10ml无水酒精中，取其1ml加入到99ml的2%氯化钠溶液中，再取其0.5ml氯化钠龙胆紫溶液加入到99.5ml2%氯化钠溶液中即成。

   送检时亦象上述采集注意事项要求的一样，需附详细的标签。采自疫区的活蚤在送检过程中需防止玻璃容器打碎，而引起疫蚤逃逸。接收人在收到标本时应作好登记。

   (三)蚤类永久保存标本的制作

   蚤类标本的保存方式通常有酒精浸泡和封片2种。前者上述已提过，方法较简单，但作为分类研究就必须制作透明标本。酒精浸泡的标本只是一种临时处理，而且要注意盛装容器密封，以保证标本始终浸泡在酒精溶液内。

   通过制片封藏的标本不但便于显微镜下的分类鉴定，而且也是永久性保存的最佳方法。这对于搞媒介或分类的专业人员来说是一项必须掌握的基本技术。

   1、透明标本制作程序

  （1）消蚀  用10%氢氧化钾或氢氧化钠溶液浸泡跳蚤，浸泡时间以蚤体大小、骨化程度及作用温度而决定。一般来说，蚤体越小，作用温度越高，需时就越短。在室温下进行消蚀应经常观察，见蚤体颜色由深棕色变淡棕色，呈半透明时即可。在室温下通常需消蚀1-3天。如遇有蚤刚吸过血其腹内留有血块，可在解剖镜下用昆虫针自蚤的第2、3腹节处刺破，这对腐蚀腹内残物，增加透明度有一定好处。

  （2）中和  消蚀好的蚤用清水冲洗2次，投入1%冰醋酸溶液中，一般中和作用时间约2小时。使残留在跳蚤组织中的氢氧化钠得以终止作用，然后再以清水浸泡1小时左右便可开始脱水。

   （3）脱水  由于蚤体有水会影响透明、并不能与封藏液亲和，所以在封片前必须脱水。脱水过程是由低到高浓度酒精的逐级脱水法。将消蚀的蚤体在50%、70%、95%和无水酒精各浸泡0.5-2小时。再于石碳酸与二甲苯等量溶液中浸泡0.5-1小时。

  （4）透明  透明剂有二甲苯、丁香油和冬绿油等，但通常多用二甲苯。脱冰后的跳蚤经二甲苯透明1-24小时后再移至丁香油中浸1-24小时，使其进一步透明软化。

   (5)封片  已透明的标本宜尽快用封藏液封片。封藏液多用加拿大树胶，先将固体状树胶研碎加二甲苯调配缓缓溶化成稀薄的稠状溶液。封片时跳蚤的腿应用小镊子拉直，头向左，腿向下，背朝上。

  （6）干燥  新封的标本可平放于盒内自然干燥，但待干的时间要半年左右。因此，一般将封固好的标本置40-50℃干燥箱内烘干，约3-4天即可。但干燥的温度不宜过高。

   制好的标本应贴上标签，内容可分写2张标签，左边填写蚤种拉丁学名，其下写中文名；右边自上而下填写宿主、采集地点和采集时间。如不用标签亦可用特制墨水填写，这样的墨水在玻片上不易脱落。配方如下:

            95%酒精100ml

     A·          + (为酒精复红饱和溶液，室温2-3天才能溶解)

              碱性复红10g

             揉酸    20g

      B·        +               成20%揉酸水溶液

            蒸馏水  80ml

   两溶液各半配在一起则成。

   2、标本制作的注意事项

   （1）在消蚀和中和后，必须用清水洗净，以避免酸、碱继续作用。

   （2）移动液体时宜用吸管吸去原液，再加入要更换的液体，以免移动蚤体造成损坏。

   （3）每张片只宜作1只跳蚤，或同种的1雌1雄，切禁不同种不同寄主的蚤混制在1张标本片上。

  （4）标本制作时，为了使位置正确，可用1张纸画如下图形，然后把玻片放在此纸上面。若是单独1只蚤，可以放在交叉线的中央，若雌雄两蚤时，可分别列于左右两侧，雄蚤在左雌蚤在右。见图

蚤类透明标本封片图示

   （5）在制片过程中，先将1小滴加拿大胶滴于玻片上，将蚤摆正后，再轻轻盖上盖玻片，用手 指轻压盖玻片底边，然后将加拿大胶由盖玻片上边的空隙滴加渗入，这样可避免移动和产生气泡。

附件2

啮齿动物标本的制作方法

一、标本的收集、处理、测定及鉴别

     (一)标本收集

     必须做好采集人员的防护工作，以防感染和扩大鼠传动物病的流行。对所获标本坚持1鼠1袋的原则以布制鼠袋装好，并紧扎袋口，同时要以传标或直接标于袋上的方式注明采集地点和时间。经用乙醚、氯护或氰化钙等熏死体外寄生虫后，梳检蚤、婢、螨等体外寄生虫。此举一是防止寄生虫逃窜叮咬人畜造成疾病流行。同时积累有关昆虫相资料供分类研究参考。所得昆虫又可供自己或转让他人研究。

    然后对于所获标本中常见的，或所得个体数多的种类。要进行挑选，将其中新鲜、皮毛肢体完整无损的成年个体选出，留做标本。但若迂有特殊价值的或珍稀种类、乃至疑是新科或新亚种的鼠种，地区新记录种等就要无论成幼、新旧、既或稍有腐败或残伤，也要尽量设法保存下来，制成标本，以备日后珍藏、鉴定、订名时用。

    (二)标本度量

    对选留出的标本要按外形测量标准、项目、要求、进行测量、记录、测量的量具有精确，单位要统一，一般小型鼠重量以克(g)、长度以毫米(mm)为单位，大型啮齿类可用公斤或厘米为单位，数据一般取小数点后两位即可。

    (三)性别鉴定

    在剥皮前还有一项工作，就是性别鉴定。对成体的性别鉴定主要依睾丸、乳头、尿殖孔等。性别以符号标记。雄记为♂。雌记为♀。

1、睾丸雄性成体，辜丸发达，繁殖期降入鼠蹊部的阴囊中，外观明显可辩。雌性没有。

   2、乳头雌性成体明显，各不同种有其较固定的乳头数目，位于腹面、分胸、腹、蹊3个部位，或其中之1、2个部位。

   3、尿殖孔

   在鼠体腹正中线末端，尾基前，雄注具有肛门、沁殖孔两个开口，雌性有肛门、阴道口和沁尿孔三个开口、对成体可以此鉴定性别。对未成年个体，尤其乳鼠期，发育不全，睾丸、乳头尚不可辩，腹后开口也不分性别均两个。鉴别较困难，一般以尿殖孔与肛门距离来判定，距离大者是雄性，距离小者是雌性。在依外部特征无法鉴定时，还可“剖腹探察”，依腹内可见的阴茎、睾丸为据判定雄性；;依输卵管、子宫为据判定雌性。

要将采集地点、时间、寄生虫种类、外部测量指标、性别等情况认真记入野外工作记录，原始登记卡(表)。并填好标签，标牌号码要对应准确，保证标本的研究价值。

（四）浸泡保存

剥下的皮子，拴好标签号码，浸于70%—75%酒精溶液，保存，如需携带装于朔料桶较为方便。但保存时间过长，会脱色影响鉴定研究。

     二、制作方法

   （一）剥制标本的剥度过程

   无论是固态标本还是生态标本，都要经剥皮后才能制作。剥皮过程大致相同。四肢骨截断位置不同。固态标本前肢在肘关节断，后肢在膝关节断，头骨剥出，生态标本前肢在肩关节截断。后肢在髋关节断。头骨可留在皮内。唇口不剥离。如被剥制的是稍大的个体，如兔、早獭等。可先将口、鼻、肛门等对外开口处用棉花者塞住，以防体内污浊液体外流，污染皮毛影响毛皮颜色。其他经过都经如下步骤：

  1、开皮

   将选定备作标本的鼠仰放于解剖盘内的解剖板上，对腹毛较长的较大个体，需用毛刷蘸水沿交腹中线将皮毛浸湿，再用梳子把毛左右直线分开。然后以左手食指和中指分两侧对应固定鼠腹部，右手持解剖刀，沿腹正中线，仅将其皮(切勿触破腹肌、腹膜)自胸腹际界处开口至生殖器前端，或更前些。亦可用锐尖手术剪开皮，先用左手将腹后方皮横控起，开小口后。将一股剪尖插入皮、肌之门沿腹中线由下向上开至胸腹际界处。

 2、剥皮

   右手持摄子将皮缘夹起，左中拇食二指掐住皮外面，右手摄子松开，以摄于(非锐尖)或刀柄上端将腹部皮和肌肉剥离。遂向体后端剥离。随剥随撒滑石粉、或用脱脂棉将剥开的皮肉隔开。以防脂肪、血液等污染皮毛。迂后肢要根据标本需要“断肢”。然后将背部剥离。经“断后”、“抽尾”，后。再向前剥。此时如剥小型鼠可将剥下皮握入左手内以防污染，如是大型啮齿类可悬挂起后肢连同肉体部分，有利操作。经"断前肢"后，逐向前剥离，此时注意不要用力过大以防将开口扯大、将皮拉长、撕破等。附在皮上的四肢肌肉分别剔净。

   3、断肢

  按固态标本和生态标本要求，分别在膝关节和关节处先将肌肉切断，再延关节断开肢骨，

前肢在肩关节或肘关节处断开。

   4、断后

  在剥完后肢后，后部只有肛门生殖器和尾皮肉相连着了。先将生殖器及直肠皮肤拉一点并剪断，此时注意不要损伤皮肤可偏向肌肉一方剪断。然后再一点点剔处残留部分的肌肉组织。

5、抽尾

  断离肛门生殖器后，后端只剩下尾巴待剥了。如遇脂肪过多或尾肥大的啮齿类，可将尾腹面正中切开剥离，除去脂肪，再缝合、制做。对大多数中小型鼠类则需抽出尾椎骨。先

将尾基周围的结缔组织剔除。再用手轻轻搓尾巴，然后用左手食指拇指并辅以中指紧卡尾茎部皮缘。但要注意，不要盲目猛拉，防止撕坏皮肤。用右手紧捏尾椎基部用拉但要试探外拉，多数鼠尾在距基部不足lcm处有一难以脱离的难点。一但将这一难点攻克，尾椎便顺利徐徐抽出，留下完好的尾皮外鞘。

6、剔头

   鼠类头部本来就小，肌肉少、皮紧，又有耳、眼、唇、鼻等器官，所以剥皮过程头是最难剔的。操作要求不易过急，用刀或剪刀剥离头部时，其刃要紧贴头骨五方，切其贴近皮肤一面，否则极易损伤头皮。在头后部先可遇到一层半透明的薄膜，此乃耳基部软骨。需先将其周围的结缔组织轻剥离。当剥到可看清耳朵与头骨的相接处时，再用刀贴近头骨一面切断。再稍前剥便是眼睛了，可看见皮肤和眼球之间有l个白色的环状物。此即脸缘，要从白环与眼球之间切断，才能保证不伤皮上的眼缘。保证完好无损，再往前就是腭部，鼻尖处应从软骨处切断，既要无损皮肤，又要保护鼻骨不伤，接着是先下唇、后上唇逐一剥下。有的做生态标本将头骨留于皮肉。不剥鼻唇。当剥完体躯部后可在颈部断开、使剔头时方便操作。

 7、处理足掌

   皮肉分离后，在皮上四肢骨和足掌尚需处理，先是将皮逐步外翻，剥离然后剔除余肌，直至指(趾)部。如遇大型啮齿类，还要从掌正中切开，剔除肌肉，再按剥制方法防腐，防腐、填充、缝合。当剥到拇指时，如妨碍向前剥离，可从背关节处将其韧带切断，其他各项便好剥离了。

  8、除脂剔肌

    剥下的皮子，里面尚留有部分脂肪和零星肌肉，有的种类脂肪相当多，必须用钝刃的刀轻轻刮除、剔掉。刮除大面积部位用力要均匀，头部要特别小心，切勿伤着耳、眼、唇、等。对唇较大的种类可从中部开除去肌肉。要用解剖刀将毛囊从皮里面分割开,注意轻划,不要划透皮，以保证剥制完毕干燥后由于收缩而造成口鼻倾倒歪斜。

   9、缝嘴补残

     皮子剥下后，如做固态标本需将嘴缝合，对小型鼠只需3针即可，上唇裂l针，口每侧l针，缝合时从皮里面操作，还要仔细检查整个皮身，如发现有枪伤，裂缝小洞，均应从里面向外插针缝对妥当，然后才能制做。

 10、防腐处理

   小型鼠类如当时就制成标本可直接涂抹防腐剂：其方法是将头、四肢的皮里面翻向外，将配好的防腐剂均匀地涂抹在皮里面，尾部涂在假尾椎上。大型啮齿类由于皮板较厚，在彻底除净脂肪后，最好在盐矾液中浸泡3一7天。取出后先用清水浸软，擦净投入盛有石膏粉的干燥箱干燥，待毛面较干，抖去石膏粉，再涂防腐剂。

   二、固态标本制作

   (一)装假尾椎

     对于有尾种类，为保证其尾的原来状态，要用较硬挺的材料(如铁丝、竹签、等)做成与抽出的真尾椎骨相象的假尾椎，其端要长出1／3以上，如以铁丝为材料，外面要缠一层棉花（以脱脂棉为好），要做成由基部向尖端逐尖的尾椎形状。搓缠棉花的过程看似简单，实际操做对初学者并非容易。首先根据鼠体大小、尾的粗细、长短，选取适度的铁丝，取一簿簿的脱脂棉片，从一面开始缠卷，进而搓紧。基端棉片厚些，尖端簿些，尖端铁丝头不得露出，棉花又不得有膨大的疙瘩，否则难以插入尾内。搓好后。将面涂一层防腐作用，又起润滑作用，如用竹签，可选择或削成粗细相当的假尾椎，不必缠棉花即可涂上防腐剂的假尾椎细心插入尾鞘内，插时要试探。如内缠棉过多而不易进入须抽出从缠，否则可将尾皮插断，一定要插到尾末端，不留---点空尖。如留有空尖，标本干后，随时可折断，影响标本价值。

   (二)充填

将四肢骨翻出。缠以与原四肢肌肉削细相当的棉花，用线扎好，翻回，吻端要先填入少许棉花，再将大块棉花卷内与头身相长短粗细的棉卷，头部稍膨大，伸入皮内，然后视情况再填充所缺部位，待各部都填充适易后，将腹部开口采用由里向外插针缝合，缝合后，如发现头部尚有不满之处，可以小摄子夹少许棉花由耳孔，眼孔填入，直到头部肥瘦相当，耳竖起为止。

（三)整形固定

   将缝合后的标本摆正，置于由软木制成的标本停置板上，前肢按前后方向伸直，前肢掌面向下，后肢踱面向上，头平直前伸，下颌贴底，耳竖起，尾平直后伸，尾过长种亦可折回

，眼睑适度张开，胡须拨正，将毛刷光。并将填写好的标签栓在右后腿上，然后，用大头针固定。固定针要避开足垫，以免影响鉴定。

   三、头骨标本制作

   为保证啮齿类标本(固态标本)的使用价值，务必将将其头骨制成标本与比皮身一并保存，其制做方法与骨骼标本一致。

   1、煮熟法

将剩下的头骨放入煮沸锅里将肌肉煮熟，不易过火，然后剔肉，可煮煮剔剔为便于剔除结缔组织，可加少许苛性钾、或钠，但不能用铝锅，剔除肌肉同时挖出脑子。煮沸时间一般小鼠5分钟即可，剔除肌肉可用手术刀摄子互相配合，控脑可用铁丝制成勾状勺，在注意保护好纤细的颧弓，脆弱的鼻骨，听泡等部位的前题下，要尽量剔净肌肉，同时用较硬毛刷（牙刷），刷洗，除净残留的肌肉纤维，挖脑亦应尽最掏净，还可用镊子夹棉擦拭，最后冲洗干净。

2、生剥法

   因怕将较小型鼠的头骨煮碎。小骨汁脱离，可直接生剔肌肉、挖脑，此法费时间，但比较把握不易损坏，可用刀、剪、摄子剔，硬摘，，除去肌肉，配台刷洗、冲洗，然后浸沾防腐剂防止腐败有异味。

  3、发酵、土埋法

  将头骨浸入水中或埋于地下发酵，侍肌肉自行腐烂后用清水冲洗，制成际本，此法不易推广，尤其是在某些鼠传疾病地区，不利防病。

 4、蚁食法

  将头骨上大块肌肉、眼、舌摘除后。置于一个刚好盛下头骨的小盒，盒上挖几个可供蚂蚁出入的孔洞，然而将盒埋在蚂蚁多的地下，过几日取出，摘除残肌的工休巳由蚂蚁代劳，一个接近制成的标本被取出，稍经加工便制成头骨标本。

 全副骨胳标本的制做，万法基本与头骨标本相间。

 5、漂白

  为使骨骼标本，头骨标本洁白美观。可进行漂白处理，其方法如下几种：

  （1）苟性钾浸煮法  用苟性钾（或钠)浸煮的头骨或骨胳标本，同时就起到了漂白作用，

  （2）曝晒法  将头骨或骨骼浸湿，放在烈日下爆晒可达漂白作用。

  （3）漂白粉法  将头骨浸入3%漂白粉液中，视头骨大小可浸几分钟到几小时甚达数日，

取出后，清水再浸泡几小时，捞出晾干。

 （3）双氧水法  较小头骨可直接浸入双氧水中，经几分钟即可取出，清水冲净，较大头骨可浸入30%的双氧水中15分钟取出，取出后经清水冲洗，再放入1%过锰酸钾溶液浸泡5分钟左右，取出冲洗，再放入5%草酸中脱色，待色脱净后取出洗净晾干。

   对于漂白，有人赞同，认为漂白后失去头骨原存颜色，有损鉴定中的价值，还有主张

将头骨外涂以亮油的，目的在于起保护作用但也同样有失原样、降低标本价值，看来保持原色原形为好。制做完成后的头骨标本，最好在上下硕骨上分别标识与皮身相同的标本号，

以防研究使用时将头、身分离无法查证重归原来的同一个体。

  三、生态标本制作

   生态标本制作方法大部分与固态标本制做相同，不多叙述:只将不同的几点补述于后：

    (一)头骨处理

   制作生态标本，大多在剥皮时将头骨留在皮内，唇鼻处不剥离，所以要对头骨进行处理，因在皮身一起，不能煮沸，只好生剥、剔除、眼、舌、肌肉、挖除脑子，全部摘净后，颅脑腔内要用棉球沾以防腐剂塞进去，对两平面剔除肌肉较多的地方要在涂过防腐剂后补明棉花充成原形，有的用粘土补充，塑成原形。

    (二 )支架安装

   根据动物大小，确定粗细适度的铁丝，除尾椎外还要五条，四肢备一条，头颈脊椎一条，一端成尖，从皮与肢骨间穿入并从掌踱面伸出，有时可从掌踱面向内穿入，然后以棉花连同肢骨缠在一起。粗细与四肢一致。另一根铁丝固定于头或假头上，颌部缠以相应棉花，并与肩上部与前肢两铁丝拧在一起，再将尾椎基端铁丝与后肢两铁丝拧合于后跨之上，如铁丝较粗可将前后各掐除一两股，然而将前后铁线再根据所做姿态要求做成一定弯度拧结在一起。掐除余部，适当弯成预想形状，后充填棉花等内充物，待肥瘦适度，（略肥于活体，以待干缩后与活体相仿）。

   (三) 头唇塑型

    如所做生态标本未留原头骨，则需用粘土塑制假头，即在用棉花缠的膨大头前由口、眼、耳等处以摄、刀片等取泥，取黄土以胶水，或浆糊和成干稀适度的泥，塑成头形，唇鼻处要将皮缘固着于泥土上，使干后成头型。如是原头骨，只须用少许粘土泥，从口抵入，使唇固定，防止干缩后，呲牙咧嘴。

    (四) 固定整型

    按需要的姿势，四足距离在固定台坐板上打好眼，将四肢铁丝余头插入在板前面盘头固定，前后足掌要如活体四足着地一样放平，放实，然后将身体各部整理妥善姿势进一步做好，将耳自然竖起，尾成自然活动状态与体躯姿态适应。

    (五)镶嵌仪眼

    生态标本要求有眼才能有神态，要制做假眼球嵌入眼窝，假眼球称仪眼较大城市有专买仪眼的，是半球形的玻璃制品，也可用疾病针。黑玻璃球形纽扣，大一点的啮齿类可用各类型的试管底端从内部涂色也可用小灯炮。还可用透明塑料薄膜里面涂黑色或活体眼球色，包上棉花成球形，代替仪眼，配制仪眼，必须在动物生前仔细观察眼球颜色，在制做仪眼时，要将玻璃半球置于铁板上用酒精灯加热，热到能着松香的程度，用松香和松香油调成的瞳孔，膏在仪眼的平面画成瞳孔，再将周围用油画色涂上眼球颜色，然后将仪眼嵌入眼窝，用摄子将上下眼睑整理好，使眼睑自然张开神态。

   制做啮齿动物生态标本，必须注意到观察生活的各种姿势和神态，各部器官的相互配合关系，并记录下来，到制作时才能符合实际，做出的标本才能形象逼真栩栩如生。